Receptori asemănători toll. Variante ale receptorilor de recunoaștere a modelelor PRR. Receptori toll-like Receptori toll-like

În ultimii zece ani în domeniul imunologiei fundamentale, în special în studiile asupra mecanismelor imunității înnăscute nespecifice, s-au făcut două descoperiri remarcabile, care sunt acum considerate pe bună dreptate drept baza rezistenței înnăscute la bolile infecțioase. În primul rând, s-a constatat (B. Lemaitre et al., 1996) că proteina Toll din Drosophila, cunoscută anterior ca un instrument necesar în embriogeneza muștei, joacă un rol important în rezistența nespecifică, în special, o protejează de infecțiile cauzate de ciuperci. din genul Aspergillus . Ca rezultat al studiilor ulterioare, proteine ​​cu o funcție similară au fost găsite la mamifere, inclusiv la oameni, și au fost denumite receptori Toll-like (Toll-like) (TLR). În al doilea rând, a fost descris unul dintre primii astfel de receptori la șoareci, TLR4 (A. Poltorak și colab., 1998), pe care autorii l-au identificat ca fiind un receptor pentru lipopolizaharide (LPS), care este necesar pentru șoareci pentru recunoașterea eficientă și răspunsul imun. la bacterii gram-negative, în care LPS este o parte integrantă a membranei celulare exterioare. Aceste studii au confirmat prezența unui aparat de recunoaștere în celulele cu imunitate nespecifică înnăscută și au indicat rolul central al TLR în recunoașterea primară a agenților patogeni infecțioși la mamifere.

Descoperirea TLR a fost comparată în semnificație cu descoperirile anterioare ale receptorilor de recunoaștere pe limfocitele B și T. Dar, dat fiind faptul că mecanismele imunității înnăscute nespecifice preced includerea mecanismelor de imunitate specifică dobândită, se crede că TLR-urile sunt mai mult receptori importanțiîn ierarhia rezistenţei imune generale.

S-a dovedit acum că TLR-urile sunt o familie de glicoproteine ​​de membrană găsite în principal pe celulele dendritice, macrofage și granulocite polimorfonucleare. TLR-urile sunt membri ai superfamiliei glicoproteinelor membranare integrale de tip I, care include, de asemenea, receptori pentru interleukina-1 (IL-1R). La compararea acestor doi receptori, s-a dovedit că părțile lor extracelulare diferă semnificativ: IL-1R are trei domenii asemănătoare Ig, în timp ce TLR are secvențe de aminoacizi bogate în leucină. În contrast, domeniul citoplasmatic al TLR are o omologie ridicată cu cel al IL-1R și a fost denumit TIR (receptor Toll-IL-1) (J.L. Slack și colab., 2000). În total, domeniul citoplasmatic este format din aproximativ 200 de aminoacizi, ale căror regiuni omoloage alcătuiesc trei regiuni separate (cutii) necesare pentru transducția semnalului, adică pentru a transmite un semnal în celulă.

Celulele TLR din seria monocite-macrofage și, în primul rând, celulele dendritice, se leagă de liganzii lor și transmit un semnal de alarmă în celulă, ceea ce duce la activarea producției unui număr de citokine proinflamatorii și molecule de costimulare. Ca urmare, inflamația se dezvoltă ca o reacție de protecție a organismului față de imunitatea nespecifică și se fac primii pași pentru dezvoltarea imunității specifice (adaptative) (Sh. Akira, K. Takeda, 2004; B. Beulter, 2004).

Receptorul celular 9 ( receptor de tip toll 9, TLR9) - unul dintre reprezentanții "primei linii" a răspunsului imun al organismului - leagă în mod specific ADN-ul viral și bacterian, formând structuri dimerice caracteristice în formă de m. Interacțiunea cu ADN-ul patogen are loc datorită prezenței în acesta a unei componente speciale - motivul dinucleotidic citozină-fosfat-guanină (CpG), care se leagă selectiv de receptor în anumite locuri. Stabilirea structurii cristaline a complexului „receptor-motiv” a ajutat la o mai bună înțelegere a caracteristicilor activității acestei componente a imunității înnăscute.

Un studiu detaliat al caracteristicilor legării motivului CpG la receptor a arătat că activitatea imunostimulatoare a dinucleotidei depinde de câțiva factori importanți.

Primul iar cel mai evident dintre acestea este numărul de secvențe de citozină-guanină nemetilate din ADN-ul ostil. Cu cât sunt mai multe motive CpG prezente în lanțul nucleotidic al unei bacterii, cu atât mai mulți receptori o vor lega.

Al doilea trăsătura care a fost identificată este un anumit „șablon” al motivului, exprimat prin formulă RR CG YY(Unde CU- citozina, G- guanină și RȘi Y- orice baze purinice, respectiv pirimidinice). Este de remarcat faptul că inversarea lui C și G duce la formarea doar a complexului monomeric inactiv TLR9-СpG, în timp ce formarea celui activ implică în formă de m dimeric structura cu un raport receptor:ligand de 2:2.

Al treilea Factorul este procesarea receptorilor, care este necesară pentru formarea unui dimer stoichiometric. Dacă nu a fost prelucrată sau nu a fost prelucrată corect, practic s-au format doar forme monomerice. Dimerul TLR9 nelegat este o așa-numită buclă Z compusă din regiuni bogate în leucină ( repetare bogată în leucină, LRR) (Fig. 1).

Mecanismul de legare a motivului CpG la locul receptor a fost numit elocvent de autorii studiului " adeziv molecular» . Un fragment de ADN monocatenar se înfășoară în jurul receptorului, începând de la capătul N-terminal al moleculei de proteină și se întinde pe mai multe situsuri LRR. Este un lanț de nucleotide care poate înconjura strâns regiunile necesare ale TLR9: atunci când se încearcă utilizarea ADN-ului dublu catenar în experimente, afinitatea receptorului a scăzut brusc.

Motivul CpG în sine, prezentat ca un hexamer conform șablonului de mai sus, a format un sistem complex de legături de hidrogen cu două duzini de aminoacizi și a fost coordonat suplimentar de interacțiunile van der Waals cu alte zece reziduuri. Este important ca două molecule de ADN să fie supuse unui astfel de „atac din flancuri”, deoarece complexul receptor asociat există sub formă homodimer(Fig. 2). În ciuda abundenței de aminoacizi care leagă motivul CpG, mutațiile unora dintre ei, chiar și individual, pot reduce serios „lipirea” dinucleotidei de receptor.

Cum poate fi utilă o identificare atât de aprofundată a caracteristicilor lucrării lui TLR9? Desigur, crearea de medicamente țintite pentru a stimula sau, dimpotrivă, inhiba activitatea acestor receptori. Tulburări în funcționarea sistemului imunitar (atât în ​​direcția activării, cât și a suprimării) stau la baza multor boli infecțioase și autoimune. Cunoașterea structurii și mecanismelor de lucru ale participanților la imunitatea înnăscută va face, fără îndoială, posibilă efectuarea reglementării acestora și readucerea la normal a parametrilor „rătăciți”.

2.2. Recunoașterea extraterestră în sistemul imunitar înnăscut

in vivo pe animale knockout pentru genele TLR (prin dispariția capacității de a oferi protecție împotriva anumitor agenți patogeni). Siturile de legare TLR au o afinitate destul de mare pentru liganzi. Aceste regiuni sunt structuri în formă de potcoavă, a căror parte exterioară este formată din elice a, iar partea interioară, care leagă ligandul, este formată din straturi p. Datele despre specificitatea și localizarea TLR-urilor umane sunt prezentate schematic în Fig. 2.11.

Cel mai adesea, TLR-urile recunosc structurile care conțin lipide, oligonucleotidele și carbohidrații; cel mai puțin frecvent - proteine ​​(de exemplu, flagelina în cazul TLR-5). Este destul de dificil să se formeze un complex atunci când LPS bacterian este recunoscut de receptorul TLR-4 (vezi Fig. 2.10). Recunoașterea LPS necesită în primul rând eliberarea acestuia din peretele celular bacterian, după care formează un complex cu factorul seric LBP (LPS-binding complex - LPS-binding complex). LBP are o afinitate pentru molecula de membrană CD14, ceea ce asigură interacțiunea complexului LPS-LBP cu aceasta. Apoi, acest complex (deja atașat de membrană prin lipida A, care face parte din LPS) se leagă de suprafața interioară (hidrofobă) a moleculei MD2, suprafața sa exterioară interacționând cu suprafața interioară a potcoavei TLR-4 (adică, în de fapt, TLR-4 recunoaște nu LPS, ci MD2). Un rol similar al moleculelor coreceptoare a fost dezvăluit în recunoașterea modelelor TLR-2; în acest caz, moleculele CD14, CD36 și integrina avP3 (vitronectina) acționează ca co-receptori. Aparent, participarea unor molecule suplimentare este necesară pentru recunoașterea modelelor TLR.
Unele TLR recunosc acizi nucleici și structuri similare cu nucleotidele, ceea ce este important pentru recunoașterea atât a virusurilor, cât și a bacteriilor. Astfel, TLR-3 recunoaște ARN-ul dublu catenar caracteristic majorității virusurilor, în timp ce TLR-9 recunoaște regiunile ADN îmbogățite în secvențe CpG (Citidină-Fosfat-Guanozină) nemetilate caracteristice ADN-ului bacterian. TLR-7 și TLR-8 au o afinitate pentru derivații de imidazocolină și guanozină (de exemplu, atunci când interacționează cu aceștia, TLR-7 mobilizează protecția antivirală). Având în vedere relația structurală a acestor derivați cu ADN-ul viral, se crede că TLR-7 și TLR-8 sunt implicate în recunoașterea ARN viral monocatenar. Toate cele 4 tipuri de TLR care recunosc acizii nucleici (TLR-3, TLR-7, TLR-8, TLR-9) sunt localizate în interiorul celulei (vezi Fig. 2.11). Datorită particularităților structurii regiunii transmembranare a acestor TLR, ele sunt prezente numai pe membrana reticulului endoplasmatic, dar nu și pe plasmolemă. În timpul endocitozei materialului care conține PAMP, TLR-urile sunt mobilizate de la membrana reticulului la membrana fagolyzosome, unde recunosc modele și transmit un semnal în celulă. Localizarea TLR-3, TLR-7, TLR-8, TLR-9 nu pe suprafața celulei, ci în fagolizozom împiedică recunoașterea propriilor acizi nucleici, care este plin de dezvoltarea patologiei autoimune. ADN-ul sau ARN-ul propriu intră în fagolizozomi numai în timpul apoptozei sporite. În plus, acizii nucleici localizați în interiorul virușilor și bacteriilor devin disponibili pentru receptori doar în fagolizozomi, unde agenții patogeni sunt distruși. Expresia TLR pe celulele imune înnăscute este descrisă în Tabelul 1. 2.10.
Ca rezultat al recunoașterii ligandului TLR, este generat un semnal de activare. În acest caz, domeniul TIR intracelular și moleculele adaptoare asociate cu acesta joacă un rol decisiv. Procesul de semnalizare TLR va fi luat în considerare în contextul activării celulelor imune înnăscute (vezi Secțiunea 2.2.4).
Tabelul 2.10. Exprimarea receptorilor de tip Toll pe celulele sistemului imunitar

Acest articol de recenzie discută conceptele de bază ale receptorilor legați de membrană ai imunității înnăscute - receptorii Toll-like, principalele metode de determinare a expresiei lor utilizate în studiile clinice, precum și rezultatele obținute cu ajutorul lor. Perspectivele cercetărilor viitoare se bazează pe obținere informatii complete despre funcționarea sistemuluiTLRnecesită, de asemenea, o evaluare cuprinzătoare a tuturor legăturilor sale. Acest lucru va face posibilă clarificarea și localizarea defectelor moleculare ale tulburărilor din sistemul imunitar înnăscut, precum și evaluarea rolului acestora în patogeneza unei game largi de boli.

Iar susceptibilitatea individuală a organismului la infecții este determinată de patogenitatea microorganismelor, a factorilor mediu inconjuratorși starea sistemului imunitar. Protecția la nivel local după infecție se realizează în primul rând printr-o reacție inflamatorie tipică, care are ca scop recunoașterea și distrugerea agentului patogen și a componentelor acestuia. Limfocitele B și T, care duc un răspuns imun adaptativ, recunosc agenții patogeni folosind receptori cu afinitate ridicată. Cu toate acestea, dezvoltarea imunității adaptive are loc de obicei destul de lent, deoarece implică activarea, proliferarea limfocitelor și sinteza acestora de proteine: citokine și imunoglobuline. O dezvoltare mai rapidă a răspunsurilor imune este asigurată de răspunsul imun înnăscut, care recunoaște agenții patogeni folosind receptori speciali cu o specificitate mai largă decât receptorii limfocitari. Acești receptori recunosc structuri moleculare comune pentru grupuri întregi de agenți infecțioși, în primul rând acestea includ Receptori asemănători toll(TLR). TLR-urile interacționează cu structuri moleculare care nu există la om, dar sunt prezente pe agenții patogeni. TLR-urile sunt larg distribuite în celulele macroorganismelor. Ele induc activarea și exprimarea unor gene specifice, a căror expresie controlează mecanismele care asigură distrugerea agenților patogeni invadatori. Ca urmare a activării prin TLR, apare o gamă largă de reacții biologice - de la inducerea sintezei citokinelor și interferonilor proinflamatorii (asigurând implementarea reacțiilor imunității înnăscute) până la exprimarea moleculelor costimulatoare care promovează activarea T. -limfocite si stimuleaza dezvoltarea unui raspuns imun adaptativ.

O gamă largă de liganzi TLR și prezența acestor receptori pe multe celule contribuie la implicarea TLR în patogeneza multor boli. Defecte ale sistemului TLR, cum ar fi afectarea recunoașterii liganzilor, expresia TLR, transducția semnalului, producerea de molecule efectoare, precum și polimorfismul genei TLR, pot duce la dezvoltarea unor boli infecțioase severe (sepsis, meningită), boli autoimune, ateroscleroză, și patologia alergică. Defecte ale moleculelor implicate în transducția semnalului TLR stau la baza susceptibilității crescute la infecții. Astfel, copiii cu o mutație a genei care codifică IRAK-4-kinaza suferă de la o vârstă fragedă de infecții piogene severe cauzate de microorganisme gram-pozitive. În același timp, activarea excesivă a cascadei de semnalizare din TLR este asociată cu dezvoltarea sepsisului, bolilor inflamatorii intestinale și poate provoca distrugerea țesuturilor. Numărul de legături identificate între diferite patologii și tulburări din sistemul TLR este în creștere. În acest sens, sunt necesare metode adecvate și fiabile pentru evaluarea componentelor sistemului TLR pentru a identifica stările de imunodeficiență asociate cu activitatea funcțională afectată a TLR, care poate fi reprodusă într-un laborator clinic standard.

Definirea expresieiTLR. Expresia TLR pe suprafața celulei este cel mai adesea determinată folosind metoda imunofluorescenței. Principiul acestei metode este că folosește anticorpi monoclonali (mAb) marcați cu coloranți fluorescenți împotriva markerilor CD ai acestui tip de celule simultan cu mAb marcați cu un alt fluorocrom la TLR-ul studiat (metoda dublei etichete). Ca exemplu, oferim o scurtă descriere a metodei de determinare a TLR2 și TLR4 pe monocite atunci când se studiază o suspensie de celule mononucleare izolate din sângele periferic, dată în .

Pentru a determina expresia TLR2 și TLR4 pe monocitele din sângele periferic, celulele mononucleare izolate pe un gradient de ficoll-urografină au fost incubate cu anticorpi marcați cu FITC la CD14 +, anticorpi marcați cu PE la TLR2 și TLR4 cu controale izotip adecvate timp de 30 de minute la 4 minute. 0 C. Analiza expresiei CD14+, TLR2 şi TLR4 a fost efectuată pe un citometru de flux. Au fost evaluate procentul de monocite (celule CD 14 + -) care poartă TLR2 și TLR4 pe suprafața lor și intensitatea medie a fluorescenței (CIF), a cărei valoare a fost exprimată în unități convenționale (unități arbore) de fluorescență.

Citometrie cu laser în flux. Pregătirea probei pentru citometria în flux este de obicei efectuată în felul următor: celulele sanguine periferice nucleate sunt izolate prin sedimentarea eritrocitelor cu o soluție de gelatină 3%. Înainte de a produce anticorpi, suspensia celulară pentru studierea exprimării TLR-urilor intracelulare este pretratată cu o soluție de fixare permeabilizantă. Studiul expresiei TLR de suprafață nu necesită tratament cu această soluție, deoarece TLR1, 2, 4, 6 și 10 sunt predominant asociate membranei. Tratamentul cu anticorpi secundari anti-șoarece marcați cu FITS sau PE ar trebui, de asemenea, să respecte standardele general acceptate. O fracție IgG de la șoareci neimunizați a fost utilizată ca control izotip pentru măsurătorile citometrice. Concentraţia finală pentru test este de 2x106 celule/ml. Citometria cu laser în flux este efectuată pe un dispozitiv cu un laser argon cu o lungime de undă de 488 nm. Citogramele suspensiei celulare studiate sunt derivate pe baza parametrilor înregistrați ai împrăștierii luminii cu unghi mic (FSC) și împrăștierii luminii laterale (SSC) în modul dot-plot. Analiza intensității fluorescenței și a procentului de celule fluorescente este efectuată în regiunea verde (FITS) FL1 (530 nm) și regiunea portocalie (PE) FL2 (585 nm). Celulele sunt analizate sub un laser cu argon la un debit de 5000 celule/s. Intensitatea medie de fluorescență a celulelor este exprimată în unități convenționale de fluorescență (UEF).

nivelul de expresie ARNm al genelorTLR determinată de obicei prin PCR în timp real (RT) combinată cu transcripție inversă folosind primeri specifici. De exemplu, exprimarea genelor TLR2 şi TLR4 poate fi efectuată utilizând următorii primeri: pentru TLR-2, TLR2-F1-CCTTTCACTCAGGAGCAGCAAGC, TLR2-R1, TGGAAACG-GTGGCACAGGAC; la TLR-4 - TLR4TF6 - GAAGGGGT-GCCTCCATTTCAGC, TLR4-R6 - GCCTGAGCAGGGTCT-TCTCCA. Nivelurile de expresie a ARNm TLR sunt controlate (standardizate) de gena GAPTAH (GAPDH-F1 - TGC-MTCCTGCACCACCAACT; GAPDH-F2 - YGCCTGCTTCAC-CACCTTC) datorită exprimării similare a acestei gene în țesuturile tractului reproductiv uman.

În prezent, folosind aceste metode, au fost efectuate zeci de studii în domeniul studierii receptorilor Toll-like în diferite boli umane. Un exemplu este lucrarea „Exprimarea receptorilor de tip Toll în polipi nazali și pe celulele sanguine periferice la pacienții cu rinosinuzită polipoză”, în care analiza comparativa expresia receptorilor TLR și NOD-2 în țesuturile polipilor nazali și pe celulele sanguine periferice și a fost evaluat rolul acestor indicatori în patogeneza rinosinuzitei polipoase.

Cercetătorii au arătat că, ca urmare a studiului, dintre toți receptorii TLR și NOD studiați, cea mai patogenetică semnificație este o creștere semnificativă a expresiei receptorilor TLR4 și TLR5 pe granulocite, monocite și limfocite din sângele periferic și pe cele inflamatorii. celulele infiltrate în polipii nazali, precum și o suprimare semnificativă a expresiei TLR7 pe aceleași celule. Se știe că activarea imunității înnăscute, exprimarea crescută a TLR implică multe consecințe fiziopatologice. În ceea ce privește imunopatogenia rinosinuzitei polipe, în care infecția bacteriană și fungică joacă rolul de declanșator al inflamației imune in situ, cele mai semnificative consecințe sunt supraproducția de citokine și chemokine proinflamatorii, care este principalul factor în formarea unei infiltrat inflamator celular. Caracteristică este și intensificarea funcțiilor fagocitare și prezentatoare de antigen ale celulelor macrofago-monocitare, însoțită de hiperproducție de mediatori inflamatori. Ca urmare, se dezvoltă activarea sistemului imunitar adaptiv, care asigură desfășurarea unui răspuns imun limfocitar specific antigenului in situ.

În lucrare, autorii au dezvoltat o abordare a evaluării componentelor sistemului TLR la persoanele sănătoase, la pacienții cu imunopatologie (deficiență imunologică variabilă comună - CVID) și în procesele patologice acute de geneză non-infecțioasă folosind exemplul infarctului miocardic acut. - AMI.

Activitatea funcțională a TLR a fost evaluată prin producerea de TNF-a de către monocitele din sângele periferic uman ca răspuns la liganzii TLR. TNF-α este una dintre principalele citokine efectoare care asigură dezvoltarea unui răspuns inflamator. În metoda propusă, autorii au folosit celule mononucleare mai degrabă decât sânge integral, deoarece inhibitorii TLR solubili, citokinele preexistente în plasmă, pot afecta negativ evaluarea funcțiilor TLR.

Ca rezultat al studiilor, s-a arătat că celulele mononucleare ale pacienților cu CVID se caracterizează printr-o creștere scăzută a nivelului de TNF-α ca răspuns la liganzii TLR2, 6, 4 și 5 in vitro. Acest lucru poate duce la o slăbire a funcțiilor de protecție ale organismului la acești pacienți cu reinfecție in vivo. În dezvoltarea stărilor patologice acute, cum ar fi IMA, celulele imune înnăscute - neutrofile, macrofage, precum și citokinele proinflamatorii - joacă un rol important. Expresia lor poate fi indusă la activarea celulelor prin intermediul receptorilor imunitari înnăscuți. Când au studiat producția spontană și indusă de liganzii TLR de TNF-α de către celulele mononucleare ale pacienților cu IAM, autorii au arătat că o creștere suplimentară a producției de TNF-α de către celulele mononucleare ale pacienților ca răspuns la liganzii TLR LPS și zymosan de către A 14-a zi poate servi ca semn de prognostic al unui rezultat nefavorabil al bolii.după dezvoltarea IAM în comparație cu producția indusă de TNF-α în prima zi a bolii.

Am studiat relația dintre nivelurile de ARNm TLR2 și TLR4 și modificările profilului de imunoglobuline ale tractului urogenital la femeile cu chlamydia urogenitală.

Autorii au stabilit relația dintre profilul imunoglobulinei și expresia ARNm a receptorilor de imunitate înnăscuți ai celulelor canalului cervical (CC) în patogeneza chlamidiei urogenitale (UGC). S-a demonstrat că nivelul de IgG, IgM, IgA, slgA, precum și expresia receptorilor TLR2 și TLR4 determină și caracterizează cursul procesului infecțios, severitatea manifestărilor clinice și rezultatul bolii.

O creștere a nivelului de expresie a TLR2 și TLR4 în combinație cu o creștere a sintezei locale a slgA poate contribui la dezvoltarea unei inflamații predominant locale și la un rezultat favorabil al bolii. Potrivit cercetătorilor, acești indicatori pot fi utilizați ca criterii suplimentare în evaluarea formei procesului de chlamydia și a severității cursului acestuia.

În această lucrare a fost studiat rolul receptorilor Toll-like în dezvoltarea inflamației imune la nivelul pielii pacienților cu psoriazis. Studiul numărului și distribuției receptorilor toll-like TLR2, TLR4 și TLR9 în structurile pielii a fost efectuat prin metoda imunohistochimică folosind anticorpi monoclonali. Autorii au stabilit o expresie crescută a TLR2 și TLR4 pe celulele epidermice și pe celulele endoteliale vasculare ale pacienților cu psoriazis, în absența exprimării TLR9. Potrivit autorilor, acest lucru contribuie la dezvoltarea reacțiilor inflamatorii cronice.

În muncă a fost studiată asocierea polimorfismelor din genele TLR2 și TLR9 cu nașterea prematură de origine infecțioasă și infecția intrauterină. Markerii polimorfi din gena TLR2 au fost determinați în material clinic folosind PCR, un marker polimorf din gena TLR9 a fost determinat utilizând PCR în timp real. S-a demonstrat că alela Arg a markerului polimorf Arg753Gln al genei TLR2 a fost asociată cu infecția intrauterină. O altă alelă A a markerului polimorf A2848G al genei TLR9 este asociată cu livrarea urgentă în infecția urogenitală.

În muncă Cu a rezumat materialele privind rolul receptorilor Toll-like (TLR) și liganzii acestora în patogenia aterosclerozei. Lipopolizaharidele bacteriene (LPS), care interacționează cu TLR4, pot induce formarea de leziuni aterosclerotice în peretele arterial. Riscul de ateroscleroză este redus de deteriorarea mutațională a TLR4. Alți liganzi microbieni și proteine ​​de șoc termic pot fi, de asemenea, implicați în inducerea aterosclerozei. A fost propusă o teorie unificată a aterogenezei, conform căreia inducerea și progresia aterogenezei este un efect secundar al interacțiunii liganzilor exogeni și endogeni cu TLR.

Am studiat activitatea funcțională mediată de TLR a celulelor mononucleare din sângele periferic la copiii cu diferite forme neutropenie. Autorii au descoperit că liganzii TLR2, TLR4, TLR5 au avut o activitate stimulatoare crescută asupra producției de TNFα MNC la copiii cu neutropenie congenitală și nu au afectat MNC la copiii cu neutropenie imună. La copiii cu forma imună a neutropeniei, a fost evidențiată o creștere semnificativă a producției stimulate de IFNa ca răspuns la liganzii TLR3, TLR8 și TLR9. Autorii cred că modificările identificate în activitatea funcțională mediată de TLR a MNC-urilor la copiii cu diferite forme de neutropenie pot avea o importanță semnificativă în dezvoltarea și cursul infecțiilor la acești pacienți.

Lucrarea a determinat expresia TLR în splina și ganglionii limfatici ai șoarecilor folosind metode de imunizare a mucoasei. Șoarecii au fost imunizați cu vaccinul multicomponent Immunovac pe mucoase și subcutanat. Pe baza datelor obținute, autorii consideră că diferite grade de sensibilizare cu diferite căi de administrare a acelorași medicamente sunt deja predeterminate în stadiul de interacțiune între ligand și TLR.

În această lucrare, a fost studiată semnificația expresiei TLR pentru alegerea corecției farmacologice a patologiei colului uterin și a endometrului. După tratamentul cu nucleospermat de sodiu, s-a înregistrat o creștere a frecvenței celulelor care exprimă tipurile TLR4 și TLR9 în materialul de testat, precum și o scădere a cantității de papilomavirus uman cu risc oncogen ridicat.

Am studiat efectul lornoxicamului inhibitor de ciclooxigenază asupra producției mediată de TLR de citokine proinflamatorii și antiinflamatorii de către celulele mononucleare din sângele periferic ale donatorilor sănătoși și ale pacienților cu pancreatită acută. S-a demonstrat că lornoxicamul inhibă producția mediată de TLR atât a citokinelor proinflamatorii (IL-1, 6, 8, 12, TNFα) cât și a citokinei antiinflamatorii IL-10 de către aceste celule. Utilizarea lornoxicamului la pacienții cu pancreatită acută în stadiul inițial al bolii a condus la o scădere a producției de TNFα de către celulele mononucleare din sângele periferic ca răspuns la LPS și, în consecință, la o scădere a funcțiilor efectoare ale TLR4 și TLR1/ 2 la acești pacienți, ceea ce reduce riscul de complicații.

Determinarea expresiei TLR și a activității lor funcționale este stadiul inițialîn evaluarea sistemului TLR la om. Pentru a obține informații complete despre funcționarea sistemului TLR, este necesară o evaluare cuprinzătoare a tuturor legăturilor acestuia. O abordare similară a fost formulată mai devreme pentru a evalua starea imună conform principiului patogenetic: s-a propus evaluarea diferitelor etape ale funcționării sistemului imunitar. Etapele ulterioare ale evaluării sistemului TLR ar trebui să includă analiza tuturor celorlalte componente ale sistemului TLR: evaluarea exprimării moleculelor implicate în transducția semnalului, factorii de transcripție etc. Acest lucru va clarifica și localiza defectele moleculare ale tulburărilor la nivelul înnăscut. sistemul imunitar, precum și evaluarea rolului lor în patogeneza unei game largi de boli.

O contribuție importantă la studiul acestei probleme poate fi adusă de studii experimentale folosind șoareci transgenici și cu gene knockout cu diferite defecte ale genelor pentru a determina mai bine efectul exprimării și polimorfismului TLR asupra susceptibilității la diferite boli, inclusiv boli infecțioase. De asemenea, este de oarecare interes să studiem căile individuale care utilizează proteine ​​adaptoare specifice pentru fiecare TLR, deoarece acest lucru ar trebui să ne extindă înțelegerea răspunsurilor organismului la diferiți liganzi TLR.

Literatură

1. Simbirtsev A.S. Proteine ​​Toll: receptori specifici ai imunității nespecifice. Imunologie 2005; 26 (6) : 368-376.
2. Werling D., Jungi T.W. TLR îi place răspunsul imun înnăscut și adaptiv. Veterinar. Imunol. Imunopatol. 2003; 91 : 1-12
3. Rakoff-Nahoum S., Paglino J., Eslami-Varzaneh F. et al. Recunoașterea microflorei comensale de către TLR este necesară pentru homeostazia intestinală. Cell 2004; 118 : 229-241.
4. Zarember K., Godowski P. Expresia tisulară a receptorilor umani Toll-like și reglarea diferențială a ARNm-urilor receptorilor Toll-like în leucocite ca răspuns la microbi, produsele lor și citokine. J. Immunology 2002; 168 :554-561.
5. Harter L., Mica L., Stocker R. et al. șoc, 2004, 5 : 403-409.
6. Li Liwu Curr. Țintele medicamentului-inflamm. Alergie, 2004, 3 : 81-86.
7. Vandenbulcke L., Bachert C., Cauwenberge P.V. et al. Int. Arc. Alergie Imunol., 2006, 139 : 159-165.
8. Picard C., Puel A., Bonnet M. et al. știință, 2003, 299 : 2076-2079.
9. L.V. Kovalchuk, M.V. Khoreeva și colab.. Receptorii imunității înnăscute: abordări ale evaluării cantitative și funcționale a TLR uman. Imunopatologie și imunologie clinică 2008, 223-227.
10. MZ Saidov, Kh.Sh. Davudov și colab.Expresia TLR în polipii nazali și pe celulele sanguine periferice la pacienții cu rinosinuzită polipă. Imunologie, 2008, 5 : 272-278.
11. V.A.Aleshkin, A.V.Karaulov și colaboratorii Asociația nivelurilor de ARNm TLR2 și TLR4 cu modificări ale profilului imunoglobulinei al tractului urogenital în chlamydia urogenitală la femei.
12. Khaitov R.M., Pashchenkov M.V., Pinegin B.V. Biologia receptorilor sistemului imunitar înnăscut. Physiol. si patol. Sistemul imunitar, 2008, 6: 3-28.
13. Pitzurra L., Bellocchio S., Nocentini A. et al. Reactivitate imunică antifungică în polipoza nazală. Infecta. Și Imun., 2004, 12 : 7275-7281.
14. Wang J., Matsukura S., Watanabe S. şi colab. Implicarea TLR-urilor în răspunsul imun al celulelor epiteliale polipului nazal. Clin. Immunol., 2007, 3 : 345-352.
15. Huvenne W., van Bruaene N., Zhang N. și colab. Rinosinusita cronică cu și fără polipi nazali: care este diferența? Curr. Allergy Asthma Rep., 2009, 3:213-220.
16. Khaitov R.M., Pinegin B.V., Pashchenkov M.V. Semnificația activității funcționale a receptorilor Toll-like și a altor receptori ai sistemului imunitar înnăscut în fiziologia rinichilor. Jurnalul rus de fiziologie, 2007, 5: 505-520.
17. Medzhitov R. Recunoașterea microorganismelor și activarea răspunsului imun. Natura, 2007, 18: 819-826.
18. Uematsu S., Akira S. TLRs și imunitatea înnăscută. J. Mol. Med. 2006 84: 712-725.
19. Kovalchuk L.V., Cheredeev A.N. Probleme reale evaluarea sistemului imunitar uman. Imunologie, 1990, 3 : 4-7.
20. Katunin O.R., Rezaikina A.V., Kolykhanova O.I. „Rolul receptorilor de recunoaștere în inițierea inflamației imune în pielea pacienților cu psoriazis”. Buletin de dermatologie și venerologie, 2010, 5 : 84-91.
21. Gankovskaya O.A. „Un studiu al asocierii markerilor polimorfi ai genelor TLR2 și TLR9 cu nașterea prematură și infecția intrauterină”. Imunologie medicală, 2010, 1-2: 87-94.
22. Glintsburg A.L., Likhoded V.G., Bondarenko V.M. „Factori exogeni și endogeni în patogeneza aterosclerozei. Teoria receptorilor aterosclerozei. Jurnalul Rus de Cardiologie 2010, 2 : 92-96.
23. Mamedova E.A., Kovalchuk L.V., Finogeneva N.A., Polovtseva T.V., Gracheva L.A., Goldyreva N.G., Khoreva M.V., Fetisova L.Ya., Nikonov A .CU. Activitatea funcțională mediată de TLR a celulelor mononucleare la copiii cu neutropenie. Microbiologie, epidemiologie și imunobiologie, 2010, 2 : 64-68
24. Akhmatova N.K., Egorova N.B., Akhmatov E.A., Kurbatova E.A., Semenova I.B., Chertov I.V., Semenov B.F., Zverev V.V. Exprimarea TLR în splină și ganglioni limfatici în metodele de imunizare a mucoasei. Microbiologie, epidemiologie și imunobiologie, 2010, 1 : 50-54.
25. Proshin S.N., Glushakov R.I., Shabanov P.D., Saikovskaya L.A., Semenova I.V., Tapilskaya N.I. Semnificația expresiei TLR pentru alegerea corecției farmacologice a patologiei colului uterin și a endometrului. Transplantologie celulară și inginerie tisulară, 2011, 6(1): 91-97.
26. Kovalchuk L.V., Khoreva M.V., Nikonova A.S., Grechenko V.V., Agapov M.A., Indrakov V.A., Leonenko I.V., Gorsky V.A., Gracheva L .A. Efectul corector al unui inhibitor de ciclooxigenază asupra stării funcționale a celulelor mononucleare care exprimă TLR. Microbiologie, epidemiologie și imunobiologie, 2010, 1 :45-50.

Keibir aurular kezinde