Төлем тәрізді рецепторлар. Үлгіні тану рецепторларының PRR нұсқалары. Төлем тәрізді рецепторлар Тол тәрізді рецепторлар

Соңғы он жыл ішінде іргелі иммунология саласында, атап айтқанда, туа біткен бейспецификалық иммунитеттің механизмдерін зерттеуде екі көрнекті жаңалық жасалды, олар қазіргі уақытта жұқпалы ауруларға туа біткен төзімділіктің негізі болып табылады. Біріншіден, шыбын эмбриогенезінде қажетті құрал ретінде бұрын белгілі болған Дрозофиладағы Толл протеині бейспецификалық төзімділікте маңызды рөл атқаратыны, атап айтқанда, саңырауқұлақтар тудыратын инфекциядан қорғайтыны анықталды (Б. Лемаитр және т.б., 1996). Aspergillus тұқымдасының. Кейінгі зерттеулердің нәтижесінде сүтқоректілерде, соның ішінде адамдарда да ұқсас қызметі бар белоктар табылды және олар Toll-like (Toll-like) рецепторлар (TLRs) деп аталды. Екіншіден, тышқандардағы осындай алғашқы рецепторлардың бірі TLR4 сипатталды (А. Полторак және т.б., 1998), оны авторлар тышқандарға тиімді тану және иммундық жауап беру үшін қажет липополисахарид (LPS) рецепторы ретінде анықтады. грамтеріс бактерияларға, олардың ішінде LPS сыртқы жасуша мембранасының құрамдас бөлігі болып табылады. Бұл зерттеулер туа біткен спецификалық емес иммунитет жасушаларында тану аппаратының болуын растады және сүтқоректілердегі жұқпалы патогендерді бірінші рет тануда TLR орталық рөлін көрсетті.

TLR ашылуы маңыздылығы жағынан В және Т лимфоциттеріндегі тану рецепторларының бұрынғы ашылымдарымен салыстырылды. Бірақ туа біткен спецификалық емес иммунитеттің механизмдері спецификалық жүре пайда болған иммунитеттің механизмдерін қосудан бұрын болатынын ескере отырып, TLR көп деп саналады. маңызды рецепторларжалпы иммундық қарсылық иерархиясында.

Қазіргі уақытта TLR негізінен дендритті жасушаларда, макрофагтарда және полиморфты ядролық гранулоциттерде кездесетін мембраналық гликопротеидтер тобы екендігі дәлелденді. TLRs I типті интегралды мембраналық гликопротеидтердің суперсемьясының мүшелері болып табылады, олардың құрамына интерлейкин-1 (IL-1R) рецепторлары да кіреді. Осы екі рецепторды салыстырған кезде олардың жасушадан тыс бөліктері айтарлықтай ерекшеленетіні анықталды: IL-1R үш Ig тәрізді доменге ие, ал TLR-де лейцинге бай аминқышқылдарының тізбегі бар. Керісінше, TLR цитоплазмалық домені IL-1R-ге жоғары гомологияға ие және TIR (Toll-IL-1 рецепторы) деп аталды (J.L. Slack және т.б., 2000). Барлығы цитоплазмалық домен шамамен 200 аминқышқылдарынан тұрады, олардың гомологтық аймақтары сигнал беру үшін қажетті үш бөлек аймақты (қораптарды) құрайды, яғни. ұяшыққа сигнал беру үшін.

Моноцит-макрофагтар қатарындағы TLR жасушалары және ең алдымен дендритті жасушалар өздерінің лигандтарымен байланысып, жасушаға дабыл сигналын береді, бұл қабынуға қарсы цитокиндердің және костимуляциялық молекулалардың бірқатарының өндірісінің белсендірілуіне әкеледі. Нәтижесінде қабыну организмнің бейспецификалық иммунитеттен қорғаныс реакциясы ретінде дамиды және спецификалық (бейімделу) иммунитетті дамытуға алғашқы қадамдар жасалады (Ш. Акира, К. Такеда, 2004; Б. Beulter, 2004).

Жасушалық ақылы рецептор 9 ( ақылы рецептор 9, TLR9) - организмнің иммундық реакциясының «бірінші желісі» өкілдерінің бірі - тән m-тәрізді димерлі құрылымдарды құра отырып, вирустық және бактериялық ДНҚ-ны арнайы байланыстырады. Патогендік ДНҚ-мен әрекеттесу оның құрамында белгілі бір учаскелердегі рецептормен таңдамалы түрде байланысатын арнайы компонент – цитозин-фосфат-гуанин (CpG) динуклеотидті мотивтің болуына байланысты болады. «Рецептор-мотив» кешенінің кристалдық құрылымын құру туа біткен иммунитеттің осы компонентінің жұмысының ерекшеліктерін жақсы түсінуге көмектесті.

CpG мотивінің рецептормен байланысу ерекшеліктерін егжей-тегжейлі зерттеу динуклеотидтің иммуностимуляциялық белсенділігі бірнеше маңызды факторларға байланысты екенін көрсетті.

Біріншіжәне олардың ең айқыны – дұшпандық ДНҚ-дағы метилденбеген цитозин-гуанин тізбегінің саны. Бактерияның нуклеотидтік тізбегінде CpG мотивтері неғұрлым көп болса, соғұрлым көп рецепторлар оны байланыстырады.

Екіншіанықталған белгі - формуламен өрнектелген мотивтің белгілі бір "үлгісі" RR CG YY(Қайда МЕН- цитозин, Г- гуанин және РЖәне Ы- сәйкесінше кез келген пуриндік және пиримидиндік негіздер). Бір қызығы, С және G инверсиясы тек қана белсенді емес TLR9-СpG мономерлі кешенінің түзілуіне әкеледі, ал белсендінің түзілуі димерлі м-тәріздірецепторлы: лиганд қатынасы 2:2 болатын құрылым.

ҮшіншіФактор - стехиометриялық димерді қалыптастыру үшін қажет рецепторларды өңдеу. Егер өңдеу болмаса немесе ол дұрыс өңделмесе, іс жүзінде тек мономерлі формалар түзілді. Байланбаған TLR9 димері лейцинге бай аймақтардан тұратын Z-цикл деп аталады ( лейцинге бай қайталану, LRR) (Cурет 1).

CpG мотивінің рецепторлық сайтпен байланысу механизмін зерттеу авторлары керемет атады » молекулалық желім» . Бір тізбекті ДНҚ фрагменті рецепторды орап, ақуыз молекуласының N-ұшынан басталып, бірнеше LRR учаскелерін қамтиды. Бұл TLR9 қажетті аймақтарын тығыз қоршай алатын бір нуклеотидтік тізбек: эксперименттерде қос тізбекті ДНҚ-ны қолдануға тырысқанда, рецепторлардың жақындығы күрт төмендеді.

Жоғарыда көрсетілген шаблонға сәйкес гексамер ретінде ұсынылған CpG мотивінің өзі екі ондаған аминқышқылдары бар сутегі байланыстарының күрделі жүйесін құрады және қосымша тағы он қалдықпен ван дер Ваальс әрекеттесуімен үйлестірілді. Екі ДНҚ молекуласының мұндай «қаптардан шабуылға» ұшырауы маңызды, өйткені байланысты рецепторлық кешен пішінде болады. гомодимер(Cурет 2). CpG мотивін байланыстыратын аминқышқылдарының көптігіне қарамастан, олардың кейбіреулерінің мутациялары, тіпті жеке-жеке де, динуклеотидтің рецепторға «жабысуын» айтарлықтай төмендетуі мүмкін.

TLR9 жұмысының ерекшеліктерін осылайша терең анықтау қалай пайдалы болуы мүмкін? Әрине, бұл рецепторлардың белсенділігін ынталандыру немесе керісінше тежеу ​​үшін мақсатты препараттарды жасау. Көптеген жұқпалы және аутоиммунды аурулардың негізінде иммундық жүйенің жұмысындағы бұзылулар (белсендіру және басу бағытында) жатыр. Туа біткен иммунитетке қатысушылардың жұмысының құрылымы мен механизмдерін білу оларды реттеуді жүзеге асыруға және «адасқан» параметрлерді қалыпқа келтіруге мүмкіндік беретіні сөзсіз.

2.2. Туа біткен иммундық жүйеде бөтен тану

TLR гендері үшін нокаут жануарларда in vivo (белгілі бір қоздырғыштардан қорғауды қамтамасыз ету қабілетінің жоғалуы арқылы). TLR байланыстыру учаскелері лигандтарға өте жоғары жақындыққа ие. Бұл аймақтар жылқы тәрізді құрылымдар, олардың сыртқы бөлігі а-спиральдан, ал лигандты байланыстыратын ішкі бөлігі p-қабаттарынан түзілген. Адамның TLR ерекшеліктері мен локализациясы туралы деректер схемалық түрде суретте көрсетілген. 2.11.

Көбінесе TLR липидті құрылымдарды, олигонуклеотидтерді және көмірсуларды таниды; аз жиі – белоктар (мысалы, TLR-5 жағдайында флагеллин). Бактериялық LPS TLR-4 рецепторымен танылған кезде комплексті қалыптастыру өте қиын (2.10-суретті қараңыз). LPS-ті тану үшін ең алдымен оның бактериялық жасуша қабырғасынан шығуы қажет, содан кейін ол LBP сарысу факторымен комплекс түзеді (LPS-байланыстырушы комплекс - LPS-байланыстырушы комплекс). LBP CD14 мембраналық молекулаға жақындығы бар, ол LPS-LBP кешенінің онымен әрекеттесуін қамтамасыз етеді. Содан кейін бұл кешен (ЛПС құрамына кіретін липид А арқылы мембранаға әлдеқашан бекітілген) MD2 молекуласының ішкі (гидрофобты) бетімен байланысады, оның сыртқы беті TLR-4 жылқысының ішкі бетімен әрекеттеседі (яғни, шын мәнінде, TLR-4 LPS емес, MD2-ні таниды). TLR-2 үлгілерін тануда корецепторлық молекулалардың ұқсас рөлі анықталды; бұл жағдайда коорецепторлар ретінде CD14, CD36 молекулалары және avP3 интегрин (витронектин) әрекет етеді. Шамасы, қосымша молекулалардың қатысуы TLR үлгілерін тану үшін қажет.
Кейбір TLR нуклеин қышқылдары мен нуклеотидтерге ұқсас құрылымдарды таниды, бұл вирустарды да, бактерияларды да тану үшін маңызды. Осылайша, TLR-3 көптеген вирустарға тән қос тізбекті РНҚ-ны таниды, ал TLR-9 бактериялық ДНҚ-ға тән метилденбеген CpG (цитидин-фосфат-гуанозин) тізбегімен байытылған ДНҚ аймақтарын таниды. TLR-7 және TLR-8 имидазохолин мен гуанозин туындыларына жақындығы бар (мысалы, олармен әрекеттесу кезінде TLR-7 вирусқа қарсы қорғанысты жұмылдырады). Бұл туындылардың вирустық ДНҚ-мен құрылымдық байланысын ескере отырып, TLR-7 және TLR-8 бір тізбекті вирустық РНҚ-ны тануға қатысады деп есептеледі. Нуклеин қышқылдарын танитын TLR-тің барлық 4 түрі (TLR-3, TLR-7, TLR-8, TLR-9) жасуша ішінде локализацияланған (2.11-суретті қараңыз). Бұл ТЛР-лардың трансмембраналық аймағының құрылымының ерекшеліктеріне байланысты олар тек эндоплазмалық тордың мембранасында болады, бірақ плазмолеммада болмайды. Құрамында PAMP бар материалдың эндоцитозы кезінде TLR торлы мембранадан фаголизосома мембранасына жұмылдырылады, онда олар үлгілерді таниды және жасушаға сигнал береді. TLR-3, TLR-7, TLR-8, TLR-9 жасушаларының бетінде емес, фаголизосомада локализациясы аутоиммунды патологияның дамуына әкелетін өзіндік нуклеин қышқылдарын тануға кедергі жасайды. Меншікті ДНҚ немесе РНҚ фаголизосомаларға апоптоздың күшеюі кезінде ғана түседі. Сонымен қатар, вирустар мен бактериялардың ішінде орналасқан нуклеин қышқылдары рецепторларға тек фаголизосомаларда қол жетімді болады, бұл жерде қоздырғыштар жойылады. Туа біткен иммундық жасушалардағы TLR экспрессиясы 1-кестеде сипатталған. 2.10.
TLR лигандтарын тану нәтижесінде белсендіру сигналы жасалады. Бұл жағдайда жасушаішілік TIR домені және онымен байланысты адаптер молекулалары шешуші рөл атқарады. TLR сигнал беру процесі туа біткен иммундық жасушаларды белсендіру контекстінде қарастырылады (2.2.4 тарауды қараңыз).
2.10-кесте. Иммундық жүйе жасушаларында толь тәрізді рецепторлардың экспрессиясы

Бұл шолу мақаласында туа біткен иммунитеттің мембранамен байланысқан рецепторлары – толл тәрізді рецепторлар туралы негізгі түсініктер, олардың клиникалық зерттеулерде қолданылатын экспрессиясын анықтаудың негізгі әдістері, сондай-ақ олардың көмегімен алынған нәтижелер қарастырылады. Болашақ зерттеулердің перспективалары алуға негізделген толық ақпаратжүйенің жұмыс істеуі туралыTLRсонымен қатар оның барлық буындарын жан-жақты бағалауды талап етеді. Бұл туа біткен иммунитет жүйесіндегі бұзылулардың молекулалық ақауларын анықтауға және локализациялауға, сондай-ақ олардың кең ауқымды аурулардың патогенезіндегі рөлін бағалауға мүмкіндік береді.

Ал организмнің инфекцияларға жеке бейімділігі микроорганизмдердің патогенділігімен, факторларымен анықталады. қоршаған ортажәне иммундық жүйенің күйі. Инфекциядан кейін жергілікті деңгейде қорғау, ең алдымен, патогенді және оның компоненттерін тануға және жоюға бағытталған типтік қабыну реакциясы арқылы жүзеге асырылады. Адаптивті иммундық жауапты жүзеге асыратын В- және Т-лимфоциттер жоғары аффинді рецепторлардың көмегімен қоздырғыштарды таниды. Алайда адаптивті иммунитеттің дамуы әдетте өте баяу жүреді, өйткені ол лимфоциттердің белсендірілуін, көбеюін және олардың ақуыздардың: цитокиндердің және иммуноглобулиндердің синтезін қамтиды. Иммундық жауаптардың тезірек дамуы лимфоциттік рецепторларға қарағанда кеңірек спецификасы бар арнайы рецепторлардың көмегімен патогендерді танитын туа біткен иммундық жауаппен қамтамасыз етіледі. Бұл рецепторлар жұқпалы қоздырғыштардың барлық топтарына ортақ молекулалық құрылымдарды таниды, ең алдымен оларға жатады Төлем тәрізді рецепторлар(TLR). TLR адамдарда жоқ, бірақ патогендерде болатын молекулалық құрылымдармен әрекеттеседі. TLR макроорганизм жасушаларында кеңінен таралған. Олар спецификалық гендердің белсендірілуі мен экспрессиясын индукциялайды, олардың экспрессиясы инвазиялық қоздырғыштардың жойылуын қамтамасыз ететін механизмдерді басқарады. TLR арқылы белсендіру нәтижесінде биологиялық реакциялардың кең ауқымы орын алады - қабынуға қарсы цитокиндер мен интерферондардың синтезін индукциялаудан (туа біткен иммунитет реакцияларын жүзеге асыруды қамтамасыз ету) Т-ның белсендірілуіне ықпал ететін костимуляциялық молекулалардың экспрессиясына дейін. -лимфоциттер және адаптивті иммундық жауаптың дамуын ынталандырады.

TLR лигандтарының кең ауқымы және осы рецепторлардың көптеген жасушаларда болуы көптеген аурулардың патогенезіне TLR-нің қатысуына ықпал етеді. Лигандтарды тану, TLR экспрессиясы, сигнал беру, эффекторлық молекулаларды өндіру, сондай-ақ TLR генінің полиморфизмі сияқты TLR жүйесіндегі ақаулар ауыр жұқпалы аурулардың (сепсис, менингит), аутоиммундық аурулардың, атеросклероздың, және аллергиялық патология. TLR сигналының берілуіне қатысатын молекулалардағы ақаулар инфекцияларға жоғары сезімталдықтың негізінде жатыр. Осылайша, IRAK-4-киназаны кодтайтын геннің мутациясы бар балалар ерте жастан бастап грам-позитивті микроорганизмдер тудыратын ауыр пиогенді инфекциялармен ауырады. Сонымен қатар, TLR сигналдық каскадын шамадан тыс белсендіру сепсистің, ішектің қабыну ауруларының дамуымен байланысты және тіндердің бұзылуын тудыруы мүмкін. TLR жүйесіндегі әртүрлі патологиялар мен бұзылулар арасындағы анықталған байланыстардың саны өсуде. Осыған байланысты, стандартты клиникалық зертханада қайта шығаруға болатын TLR функционалдық белсенділігінің бұзылуымен байланысты иммун тапшылығы жағдайын анықтау үшін TLR жүйесінің құрамдас бөліктерін бағалаудың барабар және сенімді әдістері қажет.

Өрнек анықтамасыTLR. Жасуша бетіндегі TLR экспрессиясы көбінесе иммунофлуоресценция әдісі арқылы анықталады. Бұл әдістің принципі мынада: ол зерттелетін TLR-ге басқа фторхроммен таңбаланған mAb-мен бір мезгілде осы жасуша түрінің CD маркерлеріне қарсы флуоресцентті бояғыштармен таңбаланған моноклоналды антиденелерді (mAb) пайдаланады (қос таңбалау әдісі). Мысал ретінде перифериялық қаннан оқшауланған мононуклеарлы жасушалар суспензиясын зерттеу кезінде моноциттердегі TLR2 және TLR4 анықтау әдісінің қысқаша сипаттамасын береміз.

Перифериялық қан моноциттерінде TLR2 және TLR4 экспрессиясын анықтау үшін фиколл-урографин градиентінде оқшауланған мононуклеарлы жасушалар FITC таңбаланған антиденелермен CD14+, PE-таңбаланған антиденелер TLR2 және TLR4 сәйкес изотипті бақылау құралдарымен 30 минут ішінде 4 сағат ішінде инкубацияланды. 0 C. CD 14+, TLR2 және TLR4 талдау өрнегі ағын цитометрінде орындалды. Бетінде TLR2 және TLR4 бар моноциттердің (CD 14 + -жасушалар) пайызы және мәні флуоресценцияның шартты бірліктерімен (арб. бірліктермен) көрсетілген орташа флуоресценция қарқындылығы (CIF) бағаланды.

Ағындық лазерлік цитометрия.Әдетте ағынды цитометрияға үлгіні дайындау жүргізіледі келесідей: ядролы перифериялық қан жасушалары эритроциттердің 3% желатин ерітіндісімен шөгуі арқылы бөлінеді. Антиденелерді жасамас бұрын жасушаішілік TLR экспрессиясын зерттеуге арналған жасуша суспензиясы фиксинг өткізгіш ерітіндісімен алдын ала өңделеді. Беттік TLR экспрессиясын зерттеу бұл ерітіндімен өңдеуді қажет етпейді, өйткені TLR1, 2, 4, 6 және 10 негізінен мембранамен байланысты. FITS немесе PE белгісі бар тышқанға қарсы қайталама антиденелермен емдеу де жалпы қабылданған стандарттарға сәйкес болуы керек. Цитометриялық өлшеулер үшін изотиптік бақылау ретінде иммунизацияланбаған тышқандардың IgG фракциясы пайдаланылды. Талдау үшін соңғы концентрация 2x10 6 жасуша/мл. Ағындық лазерлік цитометрия толқын ұзындығы 488 нм аргон лазері бар құрылғыда жүргізіледі. Зерттелетін жасуша суспензиясының цитограммалары нүктелік режимде шағын бұрышты жарық шашырауының (FSC) және бүйірлік жарықтың шашырауының (SSC) жазылған параметрлері негізінде шығарылады. Флуоресценция қарқындылығын және флуоресцентті жасушалардың пайызын талдау жасыл аймақта (FITS) FL1 (530 нм) және қызғылт сары аймақта (PE) FL2 (585 нм) жүргізіледі. Жасушалар аргон лазерімен 5000 жасуша/с жылдамдықпен талданады. Жасушалардың орташа флуоресценция қарқындылығы кәдімгі флуоресценция қондырғыларында (UEF) көрсетіледі.

Гендердің мРНҚ экспрессия деңгейіTLRәдетте нақты праймерлер көмегімен кері транскрипциямен біріктірілген нақты уақыттағы ПТР (RT) арқылы анықталады. Мысалы, TLR2 және TLR4 гендерінің экспрессиясы келесі праймерлердің көмегімен жүзеге асырылуы мүмкін: TLR-2, TLR2-F1-CCTTTCACTCAGGAGCAGCAAGC, TLR2-R1, TGGAAACG-GTGGCACAGGAC үшін; TLR-4 - TLR4TF6 - GAAGGGGT-GCCTCCATTTCAGC, TLR4-R6 - GCCTGAGCAGGGTCT-TCTCCA. TLR мРНҚ экспрессия деңгейлері GAPTAH генімен (GAPDH-F1 - TGC-MCCCTGCACCACCAACT; GAPDH-F2 - YGCCTGCTTCAC-CACCTTS) бақыланады (стандартталған) осы геннің адамның ұрпақты болу жолының тіндерінде ұқсас экспрессиясына байланысты.

Қазіргі уақытта осы әдістерді қолдана отырып, адамның әртүрлі ауруларындағы Toll тәрізді рецепторларды зерттеу саласында ондаған зерттеулер жүргізілді. Мысал ретінде «Полипті риносинуситпен ауыратын науқастардағы мұрын полиптерінде және шеткергі қан жасушаларында толл тәрізді рецепторлардың экспрессиясы» еңбегін келтіруге болады. салыстырмалы талдаумұрын полиптерінің ұлпаларында және шеткергі қан жасушаларында TLR және NOD-2 рецепторларының экспрессиясы және бұл көрсеткіштердің полипті риносинусит патогенезіндегі рөлі бағаланды.

Зерттеушілер зерттеу нәтижесінде барлық зерттелген TLR және NOD рецепторларының ең патогенетикалық маңызы TLR4 және TLR5 рецепторларының гранулоциттерге, моноциттер мен лимфоциттерге және перифериялық қанның лимфоциттеріне экспрессиясының айтарлықтай артуы екенін көрсетті. мұрын полиптеріндегі жасушалардың инфильтраты, сондай-ақ дәл сол жасушаларда TLR7 экспрессиясының айтарлықтай басылуы. Туа біткен иммунитетті белсендіру, TLR экспрессиясының жоғарылауы көптеген патофизиологиялық салдарға әкелетіні белгілі. Бактериялық және саңырауқұлақ инфекциясы in situ иммундық қабыну триггерінің рөлін атқаратын полипті риносинуситтің иммунопатогенезіне келетін болсақ, ең маңызды салдар қабынуға қарсы цитокиндердің және химокиндердің шамадан тыс өндірілуі болып табылады, бұл қабынудың пайда болуының негізгі факторы болып табылады. жасушалық қабыну инфильтраты. Қабыну медиаторларының гиперпродукциясымен жүретін макрофаг-моноцитарлы жасушалардың фагоцитарлық және антигенді ұсыну функцияларының күшеюі де тән. Нәтижесінде, антигенге спецификалық лимфоцитарлы иммундық жауаптың in situ орналасуын қамтамасыз ететін адаптивті иммундық жүйенің белсендіруі дамиды.

Жұмыста авторлар дені сау адамдарда, иммунопатологиясы бар науқастарда (жалпы ауыспалы иммунологиялық тапшылық - CVID) және инфекциялық емес генездің жедел патологиялық процестерінде жедел миокард инфарктісі мысалында TLR жүйесінің құрамдас бөліктерін бағалау тәсілін әзірледі. - AMI.

TLR функционалдық белсенділігі TLR лигандтарына жауап ретінде адамның перифериялық қан моноциттерінің TNF-α өндіруімен бағаланды. TNF-α қабыну реакциясының дамуын қамтамасыз ететін негізгі эффекторлық цитокиндердің бірі болып табылады. Ұсынылған әдісте авторлар толық қанның орнына мононуклеарлы жасушаларды пайдаланды, өйткені еритін TLR тежегіштері, плазмада бұрыннан бар цитокиндер TLR функцияларын бағалауға кері әсер етуі мүмкін.

Зерттеулер нәтижесінде CVID пациенттерінің мононуклеарлы жасушалары in vitro жағдайында TLR2, 6, 4 және 5 лигандтарға жауап ретінде TNF-α деңгейінің төмен жоғарылауымен сипатталатыны көрсетілді. Бұл in vivo реинфекциясы бар осы емделушілерде ағзаның қорғаныс функцияларының әлсіреуіне әкелуі мүмкін. AMI сияқты жедел патологиялық жағдайлардың дамуында нейтрофилдер, макрофагтар және қабынуға қарсы цитокиндер сияқты туа біткен иммундық жасушалар маңызды рөл атқарады. Олардың экспрессиясы туа біткен иммундық рецепторлар арқылы жасуша белсендірілген кезде туындауы мүмкін. AMI бар науқастардың мононуклеарлы жасушаларының TNF-α-ның өздігінен және TLR лигандтарымен индукцияланған өндірісін зерттеу кезінде авторлар TNF-α өндірісінің қосымша ұлғаюы пациенттердің TLR лигандтары LPS және зимозанға жауап ретінде мононуклеарлы жасушаларының екенін көрсетті. 14-ші күн аурудың қолайсыз нәтижесінің болжамдық белгісі бола алады.АМИ дамығаннан кейін аурудың 1-ші күніндегі TNF-α индукцияланған өндірісімен салыстырғанда.

Біз TLR2 және TLR4 мРНҚ деңгейлері арасындағы байланысты және урогенитальды хламидиозбен ауыратын әйелдердегі урогенитальды жолдың иммуноглобулиндік профиліндегі өзгерістерді зерттедік.

Авторлар несеп-жыныс хламидиозының (UGC) патогенезінде жатыр мойны каналының (CC) жасушаларының туа біткен иммунитет рецепторларының иммуноглобулиндік профилі мен мРНҚ экспрессиясы арасындағы байланысты анықтады. IgG, IgM, IgA, slgA деңгейі, сондай-ақ TLR2 және TLR4 рецепторларының экспрессиясы инфекциялық процестің ағымын, клиникалық көріністердің ауырлығын және аурудың нәтижесін анықтайтыны және сипаттайтыны көрсетілген.

TLR2 және TLR4 экспрессия деңгейінің жоғарылауы slgA жергілікті синтезінің жоғарылауымен үйлесімде негізінен жергілікті қабынудың дамуына және аурудың қолайлы нәтижесіне ықпал етуі мүмкін. Зерттеушілердің пікірінше, бұл көрсеткіштер хламидиоздық процестің формасын және оның ағымының ауырлығын бағалауда қосымша критерий ретінде пайдаланылуы мүмкін.

Бұл жұмыста псориазбен ауыратын науқастардың терісінде иммундық қабынудың дамуындағы Толл тәрізді рецепторлардың рөлі зерттелді. Тері құрылымдарындағы ақылы рецепторлардың TLR2, TLR4 және TLR9 саны мен таралуын зерттеу моноклоналды антиденелерді қолдану арқылы иммуногистохимиялық әдіспен жүргізілді. Авторлар TLR9 экспрессиясы болмаған кезде псориазбен ауыратын науқастардың эпидермис жасушаларында және тамырлы эндотелий жасушаларында TLR2 және TLR4 экспрессиясының жоғарылауын анықтады. Авторлардың айтуынша, бұл созылмалы қабыну реакцияларының дамуына ықпал етеді.

Жұмыста TLR2 және TLR9 гендеріндегі полиморфизмдердің инфекциялық және құрсақішілік инфекцияның мерзімінен бұрын босануымен байланысы зерттелді. TLR2 геніндегі полиморфты маркерлер ПТР көмегімен клиникалық материалда анықталды, TLR9 геніндегі полиморфты маркер нақты уақыттағы ПТР көмегімен анықталды. TLR2 генінің Arg753Gln полиморфты маркерінің Arg аллелі жатырішілік инфекциямен байланысты екені көрсетілді. TLR9 генінің A2848G полиморфты маркерінің басқа А аллельі урогенитальды инфекция кезінде жедел жеткізумен байланысты.

Жұмыста біргеатеросклероздың патогенезіндегі толл тәрізді рецепторлардың (TLR) және олардың лигандтарының рөлі туралы материалдарды қорытындылады. TLR4-пен әрекеттесетін бактериялық липополисахаридтер (LPS) артерия қабырғасында атеросклеротикалық зақымданулардың пайда болуын тудыруы мүмкін. Атеросклероз қаупі TLR4-тің мутациялы зақымдануымен төмендейді. Атеросклерозды қоздыруға басқа микробтық лигандтар мен жылу соққысының ақуыздары да қатысуы мүмкін. Атерогенездің бірыңғай теориясы ұсынылды, оған сәйкес атерогенездің индукциясы мен прогрессиясы экзогендік және эндогендік лигандтардың TLR-мен әрекеттесуінің жанама әсері болып табылады.

Біз балалардағы перифериялық қанның мононуклеарлы жасушаларының TLR-делдалдық функционалдық белсенділігін зерттедік әртүрлі формаларнейтропения. Авторлар TLR2, TLR4, TLR5 лигандтарының туа біткен нейтропениясы бар балалардағы TNFα MNC өндірісі бойынша ынталандырушы белсенділігінің жоғарылағанын және иммундық нейтропениясы бар балалардағы MNC әсер етпейтінін анықтады. Нейтропенияның иммундық түрі бар балаларда TLR3, TLR8 және TLR9 лигандтарына жауап ретінде IFNα стимуляцияланған өндірісінің айтарлықтай артуы анықталды. Авторлар нейтропенияның әртүрлі нысандары бар балалардағы MNC-тің TLR-делдалдық функционалдық белсенділігінің анықталған өзгерістері осы пациенттердегі инфекциялардың дамуы мен ағымында маңызды мәнге ие болуы мүмкін деп санайды.

Жұмыс шырышты иммундау әдістерін қолдана отырып, тышқандардың көкбауырында және лимфа түйіндерінде TLR экспрессиясын анықтады. Тышқандар шырышты және тері астына көпкомпонентті Immunovac вакцинасымен иммунизацияланды. Алынған деректер негізінде авторлар бір препараттарды енгізудің әртүрлі жолдарымен сенсибилизацияның әртүрлі дәрежелері лиганд пен TLR арасындағы өзара әрекеттесу сатысында алдын ала анықталған деп есептейді.

Бұл жұмыста жатыр мойны мен эндометрий патологиясын фармакологиялық түзетуді таңдау үшін TLR экспрессиясының маңызы зерттелді. Натрий нуклеосперматымен емдеуден кейін зерттелетін материалда TLR4 және TLR9 түрлерін экспрессиялайтын жасушалардың жиілігінің жоғарылауы, сондай-ақ жоғары онкогенді қауіпті адам папилломавирусы мөлшерінің төмендеуі тіркелді.

Біз циклооксигеназа тежегішінің лорноксикамының сау донорлардың және жедел панкреатиті бар науқастардың шеткергі қан мононуклеарлы жасушаларының қабынуға қарсы және қабынуға қарсы цитокиндердің TLR-делдалдық өндірісіне әсерін зерттедік. Лорноксикамның осы жасушалардың қабынуға қарсы цитокиндердің (IL-1, 6, 8, 12, TNFα) да, қабынуға қарсы ИЛ-10 цитокиндерінің де TLR арқылы өндірілуін тежейтіні көрсетілген. Аурудың бастапқы кезеңінде жедел панкреатиті бар емделушілерде лорноксикамды қолдану LPS-ке жауап ретінде перифериялық қанның мононуклеарлы жасушаларында TNFα өндірісінің төмендеуіне және, тиісінше, TLR4 және TLR1/ эффекторлық функцияларының төмендеуіне әкелді. Бұл науқастарда 2, бұл асқыну қаупін азайтады.

TLR өрнектерін және олардың функционалдық белсенділігін анықтау бастапқы кезеңадамдардағы TLR жүйесін бағалауда. TLR жүйесінің жұмыс істеуі туралы толық ақпаратты алу үшін оның барлық сілтемелерін кешенді бағалау қажет. Патогенетикалық принцип бойынша иммундық статусты бағалау үшін осыған ұқсас көзқарас бұрын тұжырымдалған: иммундық жүйенің жұмыс істеуінің әртүрлі кезеңдерін бағалау ұсынылды. TLR жүйесін бағалаудың келесі кезеңдері TLR жүйесінің барлық басқа компоненттерін талдауды қамтуы керек: сигналды тасымалдауға қатысатын молекулалардың экспрессиясын бағалау, транскрипция факторлары және т.б. Бұл туа біткен бұзылулардың молекулалық ақауларын анықтайды және локализациялайды. иммундық жүйе, сондай-ақ олардың кең ауқымды аурулардың патогенезіндегі рөлін бағалау.

Бұл мәселені зерттеуге маңызды үлес қосуға болады эксперименттік зерттеулерәртүрлі ауруларға, соның ішінде жұқпалы ауруларға бейімділікке TLR экспрессиясы мен полиморфизмінің әсерін жақсырақ анықтау үшін әртүрлі гендік ақаулары бар трансгенді және гендік нокауттық тышқандарды пайдалану. Сондай-ақ, әрбір TLR үшін арнайы адаптер белоктарын пайдаланатын жеке жолдарды зерттеу белгілі бір қызығушылық тудырады, өйткені бұл дененің әртүрлі TLR лигандтарына жауаптары туралы түсінігімізді кеңейтуі керек.

Әдебиет

1. Симбирцев А.С. Толл белоктары: бейспецификалық иммунитеттің спецификалық рецепторлары. Иммунология 2005; 26 (6) : 368-376.
2. Верлинг Д., Юнги Т.В. TLR туа біткен және адаптивті иммундық жауапты ұнатады. Ветеринар. Иммунол. Иммунопатол. 2003; 91 : 1-12
3. Rakoff-Nahoum S., Paglino J., Eslami-Varzaneh F. et al. Ішек гомеостазы үшін комменсальды микрофлораны TLR арқылы тану қажет. Ұяшық 2004; 118 : 229-241.
4. Зарембер К., Годовски П. Адамның Toll тәрізді рецепторларының тіндік экспрессиясы және микробтарға, олардың өнімдеріне және цитокиндерге жауап ретінде лейкоциттердегі Толл тәрізді рецепторлардың мРНҚ-ларының дифференциалды реттелуі. Дж. Иммунология 2002; 168 :554-561.
5. Хартер Л., Мика Л., Стокер Р. және т.б. соққы, 2004, 5 : 403-409.
6. Ли Ливу Карр. Дәрілік мақсат - қабыну. Аллергия, 2004 ж. 3 : 81-86.
7. Ванденбулке Л., Бахерт С., Каувенберге П.В. т.б. Int. Арка. Аллергиялық иммунол., 2006, 139 : 159-165.
8. Picard C., Puel A., Bonnet M. et al. ғылым, 2003 ж. 299 : 2076-2079.
9. Л.В.Ковальчук, М.В.Хореева және т.б.Туа біткен иммунитет рецепторлары: адамның TLR сандық және функционалдық бағалау тәсілдері. Иммунопатология және клиникалық иммунология 2008, 223-227.
10. М.З.Саидов, Х.Ш.Давудов және т.б.Полипті риносинуситі бар науқастарда мұрын полиптерінде және шеткергі қан жасушаларында TLR экспрессиясы. Иммунология, 2008 ж. 5 : 272-278.
11. В.А.Алешкин, А.В.Караулов және т.б. Әйелдердегі урогенитальды хламидиоз кезінде несеп-жыныс жолдарының иммуноглобулиндік профилінің өзгеруімен TLR2 және TLR4 мРНҚ деңгейлерінің ассоциациясы.
12. Хаитов Р.М., Пащенков М.В., Пинегин Б.В. Туа біткен иммундық жүйенің рецепторларының биологиясы. Физиол. және патол. Иммундық жүйе, 2008 ж. 6: 3-28.
13. Pitzurra L., Bellocchio S., Nocentini A. et al. Мұрын полипозындағы зеңге қарсы иммундық реактивтілік. Жұқтыру. Және Иммун., 2004, 12 : 7275-7281.
14. Ван Дж., Мацукура С., Ватанабе С. және т.б. Мұрын полиптерінің эпителий жасушаларының иммундық реакциясына TLR-лердің қатысуы. Клин. Иммунол., 2007, 3 : 345-352.
15. Huvenne W., van Bruaene N., Zhang N. et al. Мұрын полиптері бар және онсыз созылмалы риносинузут: айырмашылығы неде? Curr. Allergy Asthma Rep., 2009, 3:213-220.
16. Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., Пащенков М.В. Толл тәрізді рецепторлардың және туа біткен иммундық жүйенің басқа рецепторларының функционалдық белсенділігінің бүйрек физиологиясындағы маңызы. Орыс физиологиялық журналы, 2007, 5: 505-520.
17. Меджитов Р. Микроорганизмдерді тану және иммундық жауапты белсендіру. Табиғат, 2007, 18: 819-826.
18. Уемацу С., Акира С. TLR және туа біткен иммунитет. Ж.Мол. Мед. 2006 84: 712-725.
19. Ковальчук Л.В., Чередеев А.Н. Нақты проблемаларадамның иммундық жүйесін бағалау. Иммунология, 1990 ж. 3 : 4-7.
20. Катунин О.Р., Резаикина А.В., Колыханова О.И. «Псориазбен ауыратын науқастардың терісінде иммундық қабынуды бастаудағы тану рецепторларының рөлі». Дерматология және венерология жаршысы, 2010 ж. 5 : 84-91.
21. Ганковская О.А. «TLR2 және TLR9 гендерінің полиморфты маркерлерінің шала туылу және құрсақішілік инфекциямен байланысын зерттеу». Медициналық иммунология, 2010, 1-2: 87-94.
22. Глинтсбург А.Л., Лиходед В.Г., Бондаренко В.М. «Атеросклероздың патогенезіндегі экзогендік және эндогендік факторлар. Атеросклероздың рецепторлық теориясы. Орыс кардиология журналы 2010 ж. 2 : 92-96.
23. Мамедова Е.А., Ковальчук Л.В., Финогенева Н.А., Половцева Т.В., Грачева Л.А., Голдырева Н.Г., Хорева М.В., Фетисова Л.Я., Никонов А.МЕН. Нейтропениясы бар балалардағы мононуклеарлы жасушалардың TLR арқылы функционалдық белсенділігі. Микробиология, эпидемиология және иммунобиология, 2010 ж. 2 : 64-68
24. Ахматова Н.К., Егорова Н.Б., Ахматов Е.А., Курбатова Е.А., Семенова И.Б., Чертов И.В., Семенов Б.Ф., Зверев В.В. Шырышты иммундау әдістерінде көкбауыр мен лимфа түйіндерінде TLR экспрессиясы. Микробиология, эпидемиология және иммунобиология, 2010 ж. 1 : 50-54.
25. Прошин С.Н., Глушаков Р.И., Шабанов П.Д., Саиковская Л.А., Семенова И.В., Тапильская Н.И. Жатыр мойнының және эндометрияның патологиясын фармакологиялық түзетуді таңдау үшін TLR экспрессиясының маңызы. Жасуша трансплантациясы және тіндік инженерия, 2011, 6(1): 91-97.
26. Ковальчук Л.В., Хорева М.В., Никонова А.С., Греченко В.В., Агапов М.А., Индраков В.А., Леоненко И.В., Горский В.А., Грачева Л.А. Циклооксигеназа ингибиторының TLR-экспрессиялайтын мононуклеарлы жасушалардың функционалдық жағдайына түзетуші әсері. Микробиология, эпидемиология және иммунобиология, 2010 ж. 1 :45-50.

Кейбір аулар кезінде