Proteine ​​cu oh 2 ecuație de reacție. Proprietățile chimice ale proteinelor. Utilizarea enzimelor în industrie

Denaturarea proteinelor.

Demonstrație de experimente din prezentarea „Vverițe”:

Coagularea proteinelor la încălzire Precipitarea proteinelor cu săruri ale metalelor grele

Precipitarea proteinelor cu alcool

Profesor. Proteinele se caracterizează prin reacții, în urma cărora precipită un precipitat. Dar, în unele cazuri, precipitatul rezultat se dizolvă cu exces de apă, în timp ce în altele are loc coagularea ireversibilă a proteinelor, adică. denaturare. Renaturare Acesta este procesul invers de denaturare.

La ce poate duce denaturarea?

Încălcarea sensibilității antigenice a proteinei;

Blocarea unui număr de reacții imunologice;

boli metabolice;

Inflamația membranei mucoase a unui număr de organe digestive (gastrită, colită);

Formarea pietrei (pietrele au o bază proteică).

Concluzie: Denaturarea proteinelor- un proces complex în care, sub influența unor factori externi: temperatura, acțiunea reactivilor chimici, stresul mecanic și o serie de altele, are loc o modificare în structurile secundare, terțiare și cuaternare ale macromoleculei proteice. Structura primară și, prin urmare compoziție chimică proteinele nu se modifică. modificarea în timpul denaturarii proprietăți fizice proteine, solubilitatea scade, se pierde activitate biologică, forma macromoleculei proteice se modifică, are loc agregarea.

Hidroliza proteinelor (din capitolul " 8. Proprietăți chimice proteină").

Profesor. Hidroliza proteinelor- aceasta este, în primul rând, distrugerea unuia dintre cele mai importante niveluri de organizare a moleculei proteice. Hidroliza proteinelor- distrugere structura primara proteina sub actiunea acizilor, alcalinelor sau enzimelor, ducand la formarea α-aminoacizilor din care a fost compusa.

Reacții de culoare pentru proteine ​​(biuret)

Reacția biuretului

Profesor. Reacția biuretului- reacție la legăturile peptidice.

Proteină + Cu(OH) 2 → culoarea violetă a soluției

Pe lângă reacția biuretului, există o serie de reacții de culoare care fac posibilă demonstrarea prezenței fragmentelor individuale ale unei molecule de proteine, de exemplu, xantoproteina.

Demonstrație de experiență din prezentarea „Vverițe”:

reacție xantoproteică

Profesor. reacție xantoproteică- reactie la ciclurile aromatice.

Proteină + HNO3 (k) → precipitat alb→ culoare galbenă → culoare portocalie

Proteinele ard pentru a forma azot dioxid de carbonși apă, precum și alte substanțe. Arderea este însoțită de mirosul caracteristic de pene arse.

Proteinele suferă degradare (sub acțiunea bacteriilor putrefactive), în timp ce se formează metan (CH 4), hidrogen sulfurat (H 2 S), amoniac (NH 3), apă și alți produși cu greutate moleculară mică.

CONCLUZIE:

PROTEINE- biopolimeri cu structură neregulată, ai căror monomeri sunt 20 de aminoacizi tipuri diferite. Compoziția chimică a aminoacizilor include: C, O, H, N, S. molecule de proteine poate forma patru structuri spațiale și poate îndeplini o serie de funcții în celulă și organism: construcție, catalitică, reglatoare, motorie, transport etc.

Veverițe- baza vieții pe Pământ, fac parte din piele, mușchi și țesuturi nervoase, părul, tendoanele, pereții vaselor animalelor și oamenilor; este elementul de construcție al celulei. Rolul proteinelor este greu de supraestimat; viața de pe planeta noastră poate fi într-adevăr considerată ca o modalitate de existență a corpurilor proteice care realizează schimbul de materie și energie cu mediul extern.

Deoarece proteinele conțin o varietate de grup functional, nu poate fi atribuit nici uneia dintre clasele de compuși studiate anterior. Combină caracteristicile compușilor aparținând unor clase diferite ca un punct focal. Acest lucru, combinat cu particularitățile structurii sale, caracterizează proteina ca fiind cea mai înaltă formă de dezvoltare a materiei.

Puteți cita cuvintele lui L. Pauling: „Pe bună dreptate se poate susține că proteinele sunt cele mai importante dintre toate substanțele care alcătuiesc compoziția organismelor animale și vegetale”.

Demonstrație de prezentare "Vverite"- CONCLUZIE Declarații despre viața și proteinele celebrilor

al oamenilor

„Oriunde întâlnim viața, o găsim asociată cu un corp de proteine.”

proteine ​​care sunt construite din ....

În structura unei proteine, ... se disting structuri.

Funcțiile proteinelor în organism....

proteine; reziduuri de α-aminoacizi.

C, H, O, N, S.

Zece mii, milioane.

Apă, soluții de săruri, acizi; alcalii.

Țesuturi ale organismelor vii: piele, tendoane, mușchi, unghii, păr.

Primar, secundar, terțiar, cuaternar.

Constructii, catalitice, propulsie, transport, protectie, energie.

Criterii de evaluare:

„5” - toate răspunsurile sunt corecte; „3” - 3 răspunsuri greșite;

„4” - 1-2 răspunsuri greșite; „2” - 4 sau mai multe răspunsuri greșite.

Rezumat de bază:

Proteinele sunt compuși naturali complecși cu molecul mare, formați din reziduuri de α-aminoacizi conectate prin legături peptidice (amide) - CO - NH -.

Numărul de reziduuri de aminoacizi incluse în moleculele proteice este diferit: insulina - 51, mioglobina - 140. Mr (proteină) = de la 10.000 la câteva milioane.

Mr (albus) = 36.000; Mr (proteina musculară) = 1.500.000.

Hemoglobina (C738H1166O208N203S2Fe) 4.

Structuri proteice.

Primar- succesiunea de alternanță a resturilor de aminoacizi (toate legăturile sunt covalente, puternice).

Secundar- forma lanțului polipeptidic în spațiu (cel mai adesea o spirală). Lanțul proteic este răsucit într-o spirală (datorită multor legături de hidrogen). Terţiar- o adevărată configurație tridimensională pe care o ia în spațiu o spirală răsucită (datorită legăturilor hidrofobe), niște legături S - S - (legături bisulfurice).

Cuaternar- macromolecule de proteine ​​legate între ele.

Proprietăți chimice

1) hidroliză(atunci când este încălzit cu soluții de acizi, alcaline, sub acțiunea enzimelor)

H2N ― CH2 ― C ―: N ― CH ― C ―: N ― CH ― C = O → H2N ― CH2 ― C = O +

H2O CH2 H2O CH2 OH OH

| | glicina

tripeptidă

H2N - CH - C = O + H2N - CH - C = O

serin cisteină

Hidroliza proteinelor se reduce la hidroliza poli legături peptidice. Același lucru este valabil și pentru digestia proteinelor:

proteine ​​↔ aminoacizi → sânge către toate celulele și țesuturile corpului.

2) denaturare -încălcarea structurii naturale a proteinei (sub influența căldurii și a reactivilor chimici)

3) amfoter:

Proprietățile acizilor

|__________ proprietăți ale bazelor

4) reacții de culoare ale proteinelor - reacții calitative

a) reacția xantoproteică.

Proteine ​​+ HNO3 conc. → colorare galbenă

b) reacția biuretului.

Proteină + Cu(OH) 2↓ → soluție violetă.

c) ardere- miros de pene arse.

Concluzie: reacțiile cu acid azotic concentrat (culoare galbenă), cu hidroxid de cupru (II) proaspăt precipitat (soluție violet) și arderea proteinelor (miros de pene arse) sunt calitative pentru proteine.

Rolul proteinelor în celulă.

1. Material de construcție - formarea unei învelișuri, organite și membrane celulare. Se construiesc vasele de sânge, tendoanele, părul.

2. Rol catalitic – toți catalizatorii celulari sunt proteine.

3. Funcția motorie – proteinele contractile provoacă orice mișcare.

4. Funcția de transport – hemoglobina proteică din sânge atașează oxigenul și îl transportă către toate țesuturile.

5. Rol protector - producerea de corpi proteici de anticorpi pentru neutralizarea substantelor straine.

6. Rol energetic: 1 g proteine ​​→ 17,6 kJ.

1) Reacția biuretului(pentru toate proteinele)

Proteine ​​+ СuSO 4 + NaOH culoare violet strălucitor

СuSO4 + 2NaOH Cu (OH)2 + Na2SO4

precipitat albastru

C=O:Cu:O=C C=O:N

N HOH N:O=C

complex solubil

culoare violet strălucitor

2) reacție xantoproteică(pentru proteine ​​care conțin AA cu un radical aromatic)

proteină + HNO 3 (k) sediment Culoarea galbena

| || -- H2O | ||

N CH C─ + HONO 2 NCH C─

Culoarea galbena

Dacă adăugați o soluție concentrată de amoniac, atunci apare o culoare portocalie, deoarece în nitrobenzen are loc o schimbare a densității electronilor.

3) Reacția cisteinei- reacție la reziduul AA care conține S

Proteină + NaOH + Pb(CH 3 COO) 2 PbS + proteină

Culoare neagră

| Pb+PbS

BIOCATALIZĂ

Una dintre caracteristicile importante ale reacțiilor chimice care apar în organismele vii este natura lor catalitică. O celulă vie poate fi considerată ca un reactor catalitic miniatural. Diferența dintre o celulă și un balon de chimist este că, dacă toate reacțiile din balon decurg independent (principiul fundamental al independenței reacțiilor este implementat), atunci totul în celulă este interconectat.

Acest lucru se întâmplă nu pentru că legile fizice sunt încălcate sau celula se supune altor legi - nu, doar legile operează în materia vie. Chiar în procesul de evoluție, natura a creat un aparat eficient pentru reglarea tuturor reacțiilor celulare, care permite întregii celule să controleze raportul de produse în așa fel încât toate reacțiile să funcționeze optim.

Astfel, toate bio reacții chimice sunt reactiile catalitic.

Se numesc catalizatori biologici fermenti sau enzime.

În principiu, în celulă au loc aceleași reacții chimice ca și în laboratorul chimic, dar se impun restricții severe asupra condițiilor ca reacțiile să se producă în celulă și anume, T = 37 ◦ C și P = 1 atm.

Prin urmare, adesea procesele care au loc în laborator într-o singură etapă sunt efectuate în celulele vii în mai multe etape.

Esența reacțiilor catalitice, în ciuda varietății, se rezumă la faptul că substanțele inițiale se formează cu un catalizator. conexiune intermediară, care se transformă relativ rapid în produși de reacție, regenerând catalizatorul.

Uneori, compușii intermediari pot fi izolați în formă pură, dar de obicei sunt formați din molecule instabile, a căror detectare este posibilă numai cu ajutorul instrumentelor spectrale foarte sensibile.

Procesul cu participarea unui catalizator este ciclic sau circular.

Măsura activității enzimelor este viteză(numărul de moli de substrat care suferă o schimbare în 1 minut per 1 mol de enzimă)

Numărul de rotații poate ajunge la 10 8 .

Destul de des, ciclurile mai multor catalizatori sunt conectate între ele, formând un proces circular.

Substanțele S1 și S2 sunt transformate în produsele P1 și P2. În timpul acestei transformări, mai întâi S1 reacționează cu o a treia substanță X și catalizatorul E1, formând un produs intermediar M1, care la rândul său este transformat cu ajutorul unui catalizator E2 într-un produs intermediar M2 etc.

Efectul de accelerare al catalizatorului este asociat cu o scădere a energiei de activare (aceasta este energia suplimentară care trebuie transmisă unui mol de substanță pentru ca particulele substanței să devină reactive și să poată depăși bariera energetică). a reacției).

Principalele proprietăți ale enzimelor sunt:

Eficiența, care constă în gradul de accelerare (accelerare de 100 de milioane de ori).

Creșterea specificității substratului. Enzimele disting substratul prin recunoaștere biologică (complementaritate).

Creșterea specificității reacției catalizate. Majoritatea enzimelor accelerează un tip de reacție.

Specificitate crescută pentru izomerii optici (pot fi recunoscuți izomerii din stânga și din dreapta).

Motivul tuturor proprietăților unice ale enzimelor este structura lor spațială. Acestea sunt de obicei proteine ​​globulare mult mai mari decât substratul. Această împrejurare duce la formarea unui centru activ pe suprafața enzimei în timpul evoluției, care este complementar substratului. Acesta este un lacăt și cheie.

Centrii activi condiționat sunt împărțiți în: legatori și catalitici.

Centrul de legare leagă substratul și îl orientează în mod optim față de grupa catalizată, în timp ce toate grupările active sunt concentrate în centrul de catalizare.

Dacă pentru reacție este necesară efectuarea hidrolizei (a proteinelor, a lipidelor), atunci centrul catalizat este format din radicalii laterali ai AA - reziduuri.

În acest caz, enzima constă numai din lanțuri polipeptidice. Cu toate acestea, pe lângă reacțiile hidrolitice, mai apar și altele: reacții redox, reacții de transfer ale oricăror grupări.

În aceste cazuri, enzimele conțin o parte non-proteică. Această parte este coenzima(factor r, grup protetic). Partea proteică oferă un efect de legare, iar coenzima oferă unul catalitic. Partea de proteine apoenzima.

Apoenzima + coenzima ↔holoenzima

1. În funcție de substanțele care trebuie identificate, ar trebui specificate reacțiile calitative cunoscute, reactivii și caracteristicile de identificare.

În cazul nostru, putem folosi următoarele reacții:

2. Propuneți sub forma unei scheme cea mai eficientă secvență pentru determinarea acestor compuși.

3. Indicați procedura de reacție, condițiile și scrieți ecuația de reacție indicând caracteristica de identificare a caracteristicii.

Ca test preliminar pentru proteinele solubile, puteți folosi reactivi care provoacă denaturare (pliere): termici sau chimici.

La rezolvarea acestei probleme, sunt posibile opțiuni de analiză.

Opțiunea 1. Secvența de identificare a conținutului sticlelor poate fi următoarea:

1. Efectuăm un test preliminar pentru prezența proteinelor. Probele din fiecare dintre cele 4 baloane sunt încălzite în flacăra unei lămpi cu alcool. În eprubete cu soluții proteice se observă denaturarea (proteina se coagulează și își pierde solubilitatea). În eprubete cu mostre de alte substanțe, nu se observă modificări.

2. Identificăm proteinele folosind diferența lor în compoziția de aminoacizi. Efectuăm o reacție xantoproteică cu mostre de proteine. Într-o eprubetă cu soluție de albuș de ou se observă dizolvarea precipitatului galben format inițial și apariția unei culori portocalii, întrucât compoziția albușului conține acizi aromatici (tyr, phene, tri). Gelatina nu conține aminoacizi aromatici, testul pentru prezența acestora va fi negativ.

3. Identificăm conținutul baloanelor cu glucoză și aminoacid folosind reacția cu ninhidrina. Într-o eprubetă cu glicină, apare o culoare violet caracteristică.

4. Confirmăm prezența glucozei în sticla rămasă. Glucoza aparține monozaharidelor reducătoare, prin urmare, pentru a o identifica, puteți utiliza fie reacția „oglindă de argint” (atunci când este încălzită într-o baie de apă, pe pereții eprubetei apare un strat caracteristic de oglindă de argint), fie „cuprul”. reacție oglindă” (atunci când este încălzit în flacăra unei lămpi cu alcool, un precipitat de oxid caracteristic apare roșu cărămidă cupru (I).

Opțiunea 2.

1. Determinăm apartenența compusului la grupul de proteine ​​folosind reacția biuretului cu hidroxid de cupru (II) proaspăt precipitat. În eprubete cu mostre de soluții de proteine, apare un inel violet caracteristic. Într-o eprubetă cu glucoză, dizolvarea precipitatului albastru de hidroxid de cupru (II) și apariția colorației albastre de floarea de colț datorită formării de compus complex- zaharat de cupru, o culoare albastru închis apare într-o eprubetă cu un aminoacid datorită formării unui compus complex - glicinatul de cupru.

2. Confirmăm prezența glucozei. Încălzim ambele eprubete în flacăra unei lămpi cu alcool. Într-o eprubetă cu glucoză, se formează un precipitat caracteristic de oxid de cupru roșu cărămidă (II), deoarece glucoza aparține grupului de monozaharide reducătoare.

3. Identificăm proteinele folosind diferența lor în compoziția de aminoacizi. Cu probe noi de soluții de proteine, efectuăm o reacție xantoproteică (vezi varianta 1).

Pentru o identificare mai precisă a aminoacidului, puteți lua o nouă probă și faceți reacția cu o soluție de ninhidrin.

Nu sunt excluse alte variante care diferă în secvența reacțiilor și a reactivilor.

Semnificația reacțiilor de culoare este că fac posibilă detectarea prezenței unei proteine ​​în fluide biologice, soluții și stabilirea compoziției de aminoacizi a diferitelor proteine ​​naturale. Aceste reacții sunt utilizate atât pentru determinarea calitativă cât și cantitativă a unei proteine ​​și a aminoacizilor acesteia. Unele reacții sunt inerente nu numai proteinelor, ci și altor substanțe, de exemplu, fenolul, cum ar fi tirozina, dă o culoare roz-roșu cu reactivul Millon, astfel încât efectuarea oricărei reacții pentru a stabili prezența unei proteine ​​nu este suficientă.

Există două tipuri de reacții de culoare: 1) universal - biuret (pentru toate proteinele) și ninhidrina (pentru toate A-aminoacizi si proteine); 2) specific - numai pentru anumiți aminoacizi atât în ​​molecula proteică, cât și în soluții de aminoacizi individuali, de exemplu, reacția Fohl (pentru aminoacizii care conțin sulf slab legat), reacția Millon (pentru tirozină), reacția Sakaguchi ( pentru arginină), etc.

Când efectuați reacții de culoare pentru proteine ​​și aminoacizi, trebuie mai întâi să întocmiți următorul tabel:

Reacții de culoare pentru proteine ​​(reacții calitative)

Reacții de culoare pentru proteine ​​Experiment 1. Reacția Biuret.

Reacția biuretului- calitate superioară pentru orice, fără excepție veverite, precum și produsele lor incomplete hidroliză care conțin cel puțin două legături peptidice.

Principiul metodei. Reacția biuretului se datorează prezenței legăturilor peptidice în proteine ​​(- CO - NH -), care în mediu alcalin formează cu sulfat de cupru (II) săruri de cupru de culoare roșu-violet. complexe. Reacția biuretului este dată și de unele substanțe neproteice, de exemplu biuret(NH2-CO-NH-CO-NH2), oxamidă(NH2CO-CO-NH2), serie aminoacizi (histidină, serină, treonina, asparagină).

Reacția biuretului cu glicină

Ordinea lucrării.

Se adaugă un volum egal de soluție 10% la 1 ml din soluția de proteină 1% investigată. hidroxid de sodiu(NaOH) alcalin și apoi 2-3 picături dintr-o soluție 1%. sulfat de cupru(CuSO4). soluție diluată, aproape incoloră de sulfat de cupru.

Cu o reacție pozitivă, apare o culoare violet cu o nuanță roșie sau albastră.

Experiența 2.Reacţiela „sulful slab legat”.

Principiul metodei. Aceasta este o reacție la cisteină și cistina. În timpul hidrolizei alcaline, „sulful slab legat” din cisteină și cistină se desprinde destul de ușor, rezultând formarea hidrogenului sulfurat, care, reacționând cu alcalii, dă sulfuri de sodiu sau de potasiu. Când se adaugă acetat de plumb(II), se formează un precipitat gri-negru de sulfură de plumb(II).

Ordinea lucrării.

Se toarnă 1 ml de proteină de pui nediluată într-o eprubetă, se adaugă 2 ml de soluție de hidroxid de sodiu 20%. Amestecul se fierbe ușor (pentru ca amestecul să nu fie aruncat).

În acest caz, se eliberează amoniac, care este detectat de albastrul unei hârtie de turnesol umedă adusă la deschiderea eprubetei (nu atingeți peretele). Precipitatul ușor rezultat se dizolvă la fierbere și apoi se adaugă 0,5 ml de soluție de acetat de plumb(II). Se observă un precipitat gri-negru de sulfură de plumb(II):

Chimia reactiei:

Se toarnă 1 ml într-o eprubetă. proteine ​​de pui nediluate se adaugă 2 ml. soluție concentrată de alcali, puneți mai multe cazane. La soluția fierbinte se adaugă o soluție de plumbit de sodiu - se formează o culoare galben-maro sau neagră. (Plumbitul de sodiu se prepară după cum urmează: se adaugă prin picurare o soluție alcalină la 1 ml de acetat de plumb până când hidroxidul de plumb care precipită se dizolvă mai întâi).

Dacă în molecula de proteină există aminoacizi care conțin sulf (cistina, cisteină), sulful este separat treptat de acești aminoacizi sub forma unui ion în starea de oxidare - 2, a cărui prezență este detectată de ionul de plumb. , care formează sulfură de plumb nesolubilă cu ionul de sulf:

Pb (CH 3 COO) 2 + 2NaOH Pb (OH) 2 + 2 CH 3 COONa,

Pb (OH) 2 + 2NaOH Na 2 PbO 2 + H 2 O,

Na2S + Na2PbO2 + 2H2O PbS + 4NaOH.

Experiența 3. Reacția xantoproteică a proteinelor.

Principiul metodei. Această reacție este utilizată pentru a detecta a-aminoacizi care conțin radicali aromatici. Tirozina, triptofanul, fenilalanina, atunci când interacționează cu acidul azotic concentrat, formează derivați nitro care au o culoare galbenă. Într-un mediu alcalin, derivații nitro ai acestor a-aminoacizi dau săruri de culoare portocalie. Gelatina, de exemplu, care nu conține aminoacizi aromatici, nu dă un test de xantoproteine.

Ordinea lucrării.

La 1 ml de soluție de proteine ​​​​10% din ou de pui, adăugați 0,5 ml de acid azotic concentrat. Ca urmare a coagulării proteinelor, în conținutul tubului se formează un precipitat alb sau turbiditate. Când sunt încălzite, soluția și precipitatul devin galben strălucitor. În acest caz, precipitatul este aproape complet dizolvat ca urmare a hidrolizei. După răcire, se adaugă 1–2 ml de soluție de hidroxid de sodiu 20% (până când apare o culoare portocalie a soluției).

Luați în considerare mecanismul reacției xantoproteice la radicalul tirozină:

Chimia reacției:

Efectuarea experimentului: trageți o concluzie și scrieți ecuația reacției.

Experiența 4. Reacția lui Adamkevich (pentru prezența triptofanului în proteine).

Principiul metodei. Proteinele care conțin triptofan în prezența acizilor glioxilic și sulfuric dau o culoare roșu-violet. Reacția se bazează pe capacitatea triptofanului de a interacționa într-un mediu acid cu aldehidele acidului glioxilic (care este o impuritate a acidului acetic concentrat) pentru a forma produși de condensare colorați. Reacția se desfășoară conform ecuației:

Gelatina nu dă această reacție, deoarece. nu contine triptofan. Culoarea provine din reacția triptofanului cu acidul glioxilic, care este întotdeauna prezent ca o impuritate în acidul acetic.

Aceeași reacție pentru triptofan poate fi efectuată folosind formaldehidă în loc de acid acetic, o soluție 2,5% de H2SO4 concentrat. Se amestecă soluția și după 2-3 minute. se adaugă cu agitare 10 picături de azotat de sodiu 5%. Se dezvoltă o culoare violet intens, care se bazează pe principiul metodei reactii.

Ordinea lucrării.

Se toarnă câteva picături de proteină nediluată într-o eprubetă și se adaugă 2 ml. acid acetic glacial și câteva picături de acid glioxilic. Amestecul se încălzește ușor până când precipitatul rezultat se dizolvă, se răcește și, înclinând puternic eprubeta, se toarnă cu grijă H 2 SO 4 concentrat de-a lungul peretelui, astfel încât ambele lichide să nu se amestece.

După 5-10 minute se observă formarea unui inel roșu-violet la interfața dintre cele două straturi.

Experiența 5. Reacția ninhidrinei.

Principiul metodei. a-Aminoacizii reacţionează cu ninhidrina pentru a forma un complex albastru-violet (violet Ruemann), a cărui intensitate a culorii este proporţională cu cantitatea de aminoacid. Reacția se desfășoară conform schemei:

Chimia reacției :

Reacția cu ninhidrina este utilizată pentru detectarea vizuală a a-aminoacizilor pe cromatograme (pe hârtie, în strat subțire), precum și pentru determinarea colorimetrică a concentrației de aminoacizi prin intensitatea culorii produsului de reacție.

Produsul acestei reacții conține radicalul (R) al aminoacidului original, care provoacă diferite culori: albastru, roșu etc. compuși care provin din reacția aminoacizilor cu ninhidrina.

În prezent, reacția ninhidrinei este utilizată pe scară largă atât pentru descoperirea aminoacizilor individuali, cât și pentru determinarea cantității acestora.

Ordinea lucrării.

Într-o eprubetă se toarnă 1 ml dintr-o soluție diluată 1-10% de proteină din ou de găină și 1-2 ml dintr-o soluție 1% de ninhidrin în acetonă. Conținutul tubului este amestecat și încălzit ușor într-o baie de apă timp de 2-3 minute până când apare o culoare albastru-violet, indicând prezența α -aminoacizi.

Efectuarea experimentului: trageți o concluzie și scrieți ecuația reacției.

Experimentul 6. Reacția lui Sakaguchi.

Principiul metodei. Această reacție la aminoacidul arginină se bazează pe interacțiunea argininei cu a-naftol în prezența unui agent oxidant. Mecanismul său nu a fost încă pe deplin elucidat. Aparent, reacția se desfășoară conform următoarei ecuații:

Deoarece derivații chinoneiminelor (în acest caz, naftochinona), în care hidrogenul grupei imino –NH– este înlocuit cu un radical alchil sau arii, sunt întotdeauna colorați în tonuri galben-roșu, atunci, aparent, portocaliul-roșu culoarea soluției în timpul reacției Sakaguchi se datorează apariției tocmai derivatului de naftochinonimină. Cu toate acestea, nu este exclusă posibilitatea formării unui compus și mai complex datorită oxidării ulterioare a grupărilor NH rămase ale reziduului de arginină și a inelului benzenic al a-naftolului:

Ordinea lucrării.

La 2 ml. Adăugați 2 ml de soluție de proteine ​​​​de ou de pui diluată 1%. hidroxid de sodiu 10% (NaOH) și câteva picături de soluție de alcool 0,2%. α -naftol. Se amestecă bine conținutul tubului. Apoi turnați 0,5 ml. hipobromit de sodiu (NaBrO) sau hipoclorit de sodiu (acid hipocloros de sodiu - NaOCl), se amestecă. O colorație roșie, care crește treptat, apare imediat.

Se adaugă imediat 1 ml de soluție de uree 40% pentru a stabiliza culoarea portocalie-roșu care se dezvoltă rapid.

Această reacție este caracteristică compușilor care conțin un reziduu de guanidină

NH \u003d C -NH 2,

și indică prezența aminoacidului arginină în molecula proteică:

NH \u003d C -NH - (CH 2) 3 -CH -COOH

Efectuarea experimentului: trageți o concluzie și scrieți ecuația reacției.